对于不能接受卵细胞或胚胎冷冻所需的卵巢刺激的患者以及青春期前的女孩（都不符合卵细胞冷冻的条件），卵巢组织冷冻（OTC）和随后的正位或异位卵巢组织移植（OTT）是生育力保存（FP）复苏后的理想选择。到目前为止，全球已有超过130名婴儿通过OTC和OTT出生，美国生殖医学协会在2019年取消了这些技术的 “实验性”称号。然而，在使用冷冻技术处理卵巢组织后，对后续的卵母细胞存活率和形态完整性的保护仍有争议。
香港中文大学医学院妇产科学系钟佩桦副教授团队进行了一项试点研究，通过裸鼠的异种移植来评估OTC和随后的OTT在香港的可行性。这个小鼠模型提供了重要的见解，将支持OTC和OTT在香港的临床实施。该研究以“Implementation of ovarian tissue cryopreservation in Hong Kong”为题发表在《Hong Kong Medical Journal》上。
研究总共收集了52个卵巢组织，来自12名年龄在29至41岁的患者。来自不同患者的卵巢组织根据组织大小被切成若干块。这些组织经过玻璃化或慢冻处理，然后移植到34只小鼠身上，如图1所示。
图1.流程图描述了I期和II期研究。在第一阶段，从四名患者身上收集组织并移植到九只小鼠身上。在第二阶段，收集了6名患者的组织，并将其移植到25只小鼠身上。
图1.流程图描述了I期和II期研究。在第一阶段，从四名患者身上收集组织并移植到九只小鼠身上。在第二阶段，收集了6名患者的组织，并将其移植到25只小鼠身上。移植恢复率和宏观评估
所有的异种移植都成功地从实验小鼠体内取出。宏观观察新鲜和解冻的组织，在组织的完整性或形态方面没有显示出不同冷冻方法的实质性差异（图2）。
图2.新鲜的、解冻的和移植的组织的宏观观察。（a）新鲜组织（左）和解冻的慢冻组织（右）。（b）在三只BALB/c无胸腺裸鼠的颈部皮下部位嫁接慢冻卵巢组织。（c）在三只BALB/c胸腺裸鼠的腹腔内部位移植新鲜组织（左和中）和玻璃化的卵巢组织（右）。请注意，在每个异种移植的周围都观察到了血管生成。
基质组织形态的分析
免疫组化染色显示，除了两个钙化组织外，所有取回的移植物都保持了活力（图3）。
图3.从裸鼠中取出的异种移植的卵巢基质组织的血红素和曙红（H&E）及免疫组织化学染色（400×）。（a）H&E染色；（b）分化群10染色；（c）雌激素受体染色
图3.从裸鼠中取出的异种移植的卵巢基质组织的血红素和曙红（H&E）及免疫组织化学染色（400×）。（a）H&E染色；（b）分化群10染色；（c）雌激素受体染色卵泡组织学和密度
回收的移植物用石蜡包埋，并在4或30微米的厚度上进行切片。显微镜分析显示了原始、初级和次级卵泡（图4）。
图4.显微镜下观察裸鼠移植组织中不同阶段的卵泡（400×）。（a）4µm切片中原始卵泡的苏木精和伊红（H&E）染色；（b）30µm切片中原始（左）、初级（中）和次级（右）卵泡的H&E染色
讨论
该研究证明了通过在裸鼠体内异种移植新鲜和冷冻的卵巢组织进行OTC并随后进行OTT的可行性。大多数移植的卵巢组织在移植后仍然是有活力的。两种冷冻保存方法都是可行和有效的，两种保存方法都能在移植后的解冻卵巢组织中观察到原始卵泡。注射促性腺激素后的卵泡生成没有差异。总的来说，这些发现验证了通过手术收集卵巢组织，通过慢冻或玻璃化进行冷冻保存，并随后将组织移植到小鼠体内的方案，该方案成功地在异种移植中产生原始卵泡。
OTC允许在一次手术中保存数千个原始卵泡，与成熟的卵母细胞相比，保存的原始卵泡对冷冻损伤的抵抗力更强。这种技术也适合那些因需要紧急化疗或必须避免激素敏感的恶性肿瘤的增强而不能进行促排卵的患者，它也是唯一可用于青春期前女孩的FP技术。
文章来源：
https:/pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36822598/
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